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Microscopie de molécule unique

Microscopie de molécule unique
E009
Contatcs: pascal.didier

Molécule unique:
La microscopie à molécule unique fournit des informations individuelles sur des populations hétérogènes de molécules en permettant l’accès à la distribution complète des observables. Elle permet ainsi de discriminer entre une hétérogénéité de nature statique ou dynamique et de détecter des événements rares, masqués soit par un effet de moyenne sur l’ensemble des molécules soit par l’impossibilité de synchroniser les molécules. Nous avons construit un dispositif composé d’un microscope à champ large avec illumination TIRF (Fluorescence à Réflexion Totale Interne) couplé à une EMCCD, capable d’imager des molécules uniques.

PALM et STORM:
L’imagerie Ă  haute rĂ©solution, la “nanoscopie”, permet de dĂ©passer les barrières physiques de la diffraction avec une rĂ©solution infĂ©rieure Ă  50 nm.
Dans la microscopie de localisation par photoactivation (PALM) et la microscopie par reconstruction stochastique optique (STORM), quelques molécules sont activées, imagées, puis éteintes ou photoblanchies. Une image en deçà de la limite de diffraction est alors reconstruite après avoir déterminé avec une haute précision la position de toutes les molécules individuelles.


Expert Scientifique:
pascal.didier

DĂ©tails techniques

Modes de microscopie
Microscopie à molécule unique
PALM/STORM 2D/3D
TIRF

Statif
Microscope inversĂ© Olympus IX71 disposant d’une sortie droite et gauche

Détection
DĂ©tection synchrone par 2 EMCCD (Hamamatsu ImagEM)

Lasers
405 nm
488 nm
532 nm
633 nm
980 nm

Informatique
Le système est pilotĂ© par HCImage (Hamamastu) et l’analyse se fait par des outils dĂ©diĂ©s (SpTracker, RapidStorm, logiciel 3D, Matlab)

N’oubliez pas de citer la plateforme dans les remerciements!